色譜柱:裝有固定相的管子,一般是玻璃管或者是不銹鋼管。
固定相:填入玻璃管或不銹鋼管內(nèi)靜止不動(dòng)的固體或液體。
流動(dòng)相:通過色譜柱流動(dòng)的氣體或液體。
當(dāng)流動(dòng)相中樣品混合物經(jīng)過固定相時(shí),就會(huì)與固定相發(fā)生作用,由于各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相相互作用的類型、強(qiáng)弱也有差異,因此在同一推動(dòng)力的作用下,不同分組在固定相滯留時(shí)間長(zhǎng)短不同,從而按先后不同的次序從固定相中流出。
1.按流動(dòng)相和固定相的物理狀態(tài)分類
按流動(dòng)相分為氣相色譜法和液相色譜法。固定相可以是固體或者涂漬在固體載體表面上的液體。氣相色譜又可分為氣-固色譜法和氣-液色譜法,氣液色譜的固定相是附著在惰性載體上的一層薄薄有機(jī)化合物液體。液相色譜法又分為液-固色譜法和液-液色譜法。
2.按分離機(jī)理分類(固定相與組分之間的作用力)
利用組分在固定相上的吸附能力強(qiáng)弱不同而分離的方法,稱為吸附色譜法。利用組分在液態(tài)固定相中溶解度不同而達(dá)到分離的方法稱為分配色譜法,利用組分在離子交換劑固定相上的親和力大小不同而達(dá)到分離的方法,稱為離子交換色譜法。利用大小不同的分子在多孔固定相中的選擇滲透而達(dá)到分離的方法,稱為凝膠色譜法或空間排阻色譜法。
1.分離效率高,柱效可達(dá)數(shù)十萬理論塔板數(shù)。
2.分析速度快,幾分鐘到幾十分鐘就可以進(jìn)行一次復(fù)雜樣品的分離和分析。
3.靈敏度高,可測(cè)定10-12g微量組分。
4.樣品用量少,用毫克、微克級(jí)樣品即可完成一次分離和測(cè)定。