波長對比色分析的靈敏度、準(zhǔn)確度和選擇性有很大的影響。選擇波長的原則是:吸收最多,干擾最小。因為吸光度越大,測定的靈敏度越高,準(zhǔn)確度也容易提高;干擾越小時,選擇性好,測定的準(zhǔn)確度越高。
為了減小測量誤差,一般應(yīng)使被測溶液的吸光度A處在0.1-0.7之間為宜,為此可通過調(diào)節(jié)溶液的濃度和選擇不同厚度的吸收池來達到此要求。
參比溶液亦稱空白溶液。在測定吸光度時,利用參比溶液調(diào)節(jié)儀器的零點,不僅可以消除由吸收池和溶劑對入射光的反射和吸收所帶來的誤差,而且能夠提高測定的抗干擾能力。常見的參比溶液及其作用如下:
①溶劑參比制備試樣溶液的試劑和顯色劑均無色,即溶液中除被測物質(zhì)外其他物質(zhì)對測定波長的光幾乎無吸收,可用溶劑作參比溶液,稱為溶劑參比。
②試劑參比顯色劑或其他試劑有顏色,在測定波長處有吸收,可按顯色反應(yīng)相同條件,只是不加入試樣,同樣加入所需試劑和溶劑作為參比溶液,稱為試劑參比。
③試樣參比試樣基體有色(如試樣溶液中混有其他有色離子),即在測定波長處有吸收,而與顯色劑不起顯色反應(yīng)時,可按顯色反應(yīng)相同條件,取相同量的試樣溶液,只是不加顯色劑作參比溶液,稱為試樣參比。
以上就是檢測條件對分光光度法準(zhǔn)確度的影響